柔佛海峡（
英语：Straits of Johor；
马来语：Selat Johor）是
新加坡和
马来西亚柔佛州之间的水道，东连
南中国海，西通
马六甲海峡。海峡长50公里，宽1.2～4.8公里。有一条一千零五十六米长的
新柔长堤连接两岸。在
第二次世界大战期间，
英军曾炸毁该长堤，防止
日军通过海峡，入侵新加坡。
新加坡和马来西亚在
1995年8月签订协议，划分柔佛海峡水域的
国界。在此之前，两国按照1927年海峡殖民地与柔佛领土水域协议书所划定的一条“假想线”，作为柔佛海峡水域上的国界。